大股東持股比例的規定如下：
1、出資額占有限責任公司資本總額百分之十以上股東為大股東；
2、出資額或者持有股份的比例達百分之五十的股東為控股股東；
3、上市公司持股5%以上股東為大股東。法律依據：《上市公司股東、董監高減持股份的若干規定》第二條 上市公司控股股東和持股5%以上股東（以下統稱大股東）、董監高減持股份，以及股東減持其持有的公司首次公開發行前發行的股份、上市公司非公開發行的股份，適用本規定。 大股東減持其通過證券交易所集中競價交易買入的上市公司股份，不適用本規定。 《中華人民共和國公司法》第二百一十六條 本法下列用語的含義： （二）控股股東，是指其出資額占有限責任公司資本總額百分之五十以上或者其持有的股份占股份有限公司股本總額百分之五十以上的股東；出資額或者持有股份的比例雖然不足百分之五十，但依其出資額或者持有的股份所享有的表決權已足以對股東會、股東大會的決議產生重大影響的股東。